QIAGEN RNeasy Mini Kit

從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動(dòng)純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動(dòng)化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結(jié)合能力為45 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA）。

購(gòu)買產(chǎn)品

RNeasy Mini Kit適用于分子生物學(xué)應(yīng)用。該產(chǎn)品不適用于疾病的診斷、預(yù)防或治療。

QIAGEN RNeasy Mini Kit

產(chǎn)品詳情

來(lái)自各種樣品的高質(zhì)量RNA。

甲醛瓊脂糖凝膠和使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的Northern印跡。每個(gè)泳道上樣的是從每種來(lái)源分離出的總RNA（10 µg）。所有組織均來(lái)自小鼠。酵母：釀酒酵母；大腸桿菌菌株：HB101。^32個(gè)P標(biāo)記的探針被識(shí)別為（G）GAPDH；（E）翻譯延伸因子EF-1α；（O）外膜蛋白A序列。（E和O分別由瑞士巴塞爾大學(xué)的P. Philippsen和德國(guó)圖賓根的馬克斯·普朗克生物學(xué)研究所的U. Henning分別提供。）未檢測(cè)到枯草芽孢桿菌。中號(hào)：0.24-9.5kb RNA階梯。胚胎，Huh7和HeLa細(xì)胞泳道中的7.5 kb帶（指示）是核前體RNA。

性能

RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動(dòng)物或人類組織樣本，或從100–1 x 10⁷個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA（參見(jiàn)"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples"）。

原理

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。

程序

RNeasy Mini Kit可從10–1 x 10⁷個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類組織中或小于5 x 10⁷個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對(duì)樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜（參見(jiàn)"RNeasy Mini spin column"）。RNA結(jié)合到膜上（多可結(jié)合100 µg），污染物被高效洗去。對(duì)于某些對(duì)少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用，可在RNeasy操作過(guò)程中進(jìn)行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA（參見(jiàn)"RNeasy Mini procedure"）。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。

應(yīng)用領(lǐng)域

使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A_260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應(yīng)用，包括：

• Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡

• 終點(diǎn)式RT-PCR

• 定量real-time RT-PCR

• 芯片分析

• Poly A+ RNA篩選

技術(shù)指標(biāo)